CO2光照培養(yǎng)箱是在常規(guī)培養(yǎng)的基礎(chǔ)上進行的改進，主要是通過添加CO2來滿足微生物培養(yǎng)所需的環(huán)境。主要用于組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng)。根據(jù)實驗要求，將二氧化碳培養(yǎng)框分為水套式和氣套式。
小心培養(yǎng)的細胞就這樣死掉了，是個很心痛的事情。其實影響細胞存活率的原因有很多，有時候并不是培養(yǎng)箱本身出了問題，我們的許多操作對細胞培養(yǎng)的結(jié)果也是有很大影響的，今天為大家分享一下使用CO2光照培養(yǎng)箱對細胞進行培養(yǎng)時應該注意的問題：
1.確保所有實驗室材料都無菌
交叉污染是細胞培養(yǎng)的大敵。即使是輕微的污染，也可能毀了幾個星期的成果。因培養(yǎng)箱內(nèi)溫暖潮濕，真菌易生長，因此須注意定期清潔。此外，在將培養(yǎng)瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺之前，應用酒精擦拭干凈，以避免污染。
2.小心處理您的培養(yǎng)物
細胞培養(yǎng)的脆弱性怎么強調(diào)也不為過。劇烈搖晃，或連續(xù)的溫度波動可能會對生長產(chǎn)生不利的影響。確保培養(yǎng)箱是水平的，溫度均一，且遠離電動儀器。此外，盡量避免一次處理多個細胞系，因為它可能會影響細胞的基因型和表型。您還應定期完成STR圖譜分析，以確認細胞系的身份。
3.在使用前正確解凍細胞
盡管解凍看起來是個簡單的步驟，但須操作得當，以免傷害細胞。長時間暴露在高溫條件下會使細胞無法鋪板。因此，凍存管應當在37°C水浴中放置2分鐘，然后用條件培養(yǎng)基稀釋，以避免造成直接傷害。
4.使用對數(shù)生長期的細胞
細胞培養(yǎng)過程共有3個階段：停滯期、對數(shù)期和平臺期，分別代表了低細胞生長、高細胞生長和無細胞生長。有活力的細胞是健康的，快速分裂的，在對數(shù)期以70-80%的匯合度存在。
5.利用細胞的代謝特性來優(yōu)化培養(yǎng)基
分析使用過的培養(yǎng)基，有助于鑒定必要成分的代謝速率，包括氨基酸和維生素。從細胞生長階段和蛋白生產(chǎn)階段收集到的動態(tài)代謝圖譜可用來平衡基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加培養(yǎng)基，指導培養(yǎng)基的重點，有助于蛋白質(zhì)的生產(chǎn)。
此外，在使用CO2光照培養(yǎng)箱的過程中應關(guān)好培養(yǎng)箱的門，以免氣體外泄，影響試驗效果，制冷系統(tǒng)停止工作后，用軟布擦凈工作腔和玻璃觀察窗；每次停機前，各控制開關(guān)均應處于非工作狀態(tài)才切斷電源，只有做好這些小細節(jié)，才能成功的做好實驗！
